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Calypso生物大分子相互作用分析儀工作原理

更新時間:2021-01-18      點擊次數:1869
  Calypso生物大分子相互作用分析儀是一個以組分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)為基礎的生物大分子間相互作用分析系統,可以快速、自動、無損、定量的表征大分子間的相互作用,具有重復性高、靈敏度高及無需樣品修飾等諸多優點。該系統可以分析分子間的特異性及非特異性相互作用,聚集或解離的動力學等。對于分子間的特異性相互作用,Calypso可以測定其自聚作用及不同樣品分子間的異聚作用,得到平衡解離常數Kd及反應的化學計量數。對于非特異性相互作用,可以測定其維力系數,并判斷分子間的作用力及強度。此外,Calypso還可以測定反應的動力學,樣品的重均分子量及均方根半徑等重要分子信息。Calypso分析系統無需對樣品進行修飾(熒光標記、固定化等),且在溶液環境中測量,因此可以大程度的保證樣品的天然狀態,從而得到其他技術難以得到的結果,真實的表征生物大分子間的相互作用,樣品方便回收。
 
  Calypso生物大分子相互作用分析儀工作原理:組分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是新的分析技術之一,利用分子量的變化測定分子間的相互作用。溶液中大分子的散射光強依賴于物質的濃度C和重均分子量Mw,分子間發生復合,Mw則增加。例如,若所有的蛋白質分子以二聚體形式出現,則散射光強也會增倍。對于可逆的聚集,蛋白與單體蛋白復合的比例會達到一個平衡值,這個值依賴于每種蛋白初始的濃度和緩沖液的條件。不同的組成和濃度會導致Mw不同。通過分析一系列不同組成和濃度的光散射結果,可以確定所發生的聚集形式、各自的結合親和力Ka、結合和解離平衡常數。手動配制比例及測量是一項繁瑣、費時間且容易產生操作誤差的工作,Calypso系統通過自動化的過程克服了CG-MALS手動操作的困難,將樣品配制、輸送及數據的采集和分析集合于一體,完美的保證了實驗的重復性,并解決了人工配制樣品時引入操作誤差的問題。
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